細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

WEHI 164 (鼠纖維肉瘤細(xì)胞)

商品屬性

商品介紹

組織來源 皮膚

生長特性 貼壁細(xì)胞

生物安全等級(jí) 1

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠Ⅻ(F12)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： F12 ELISA Kit

Mouse fibrinogen (Fbg) ELISA Kit 小鼠血纖蛋白原(Fbg)檢測(cè)試劑盒

RatPyruvateKinase,M2-PKELISAKit 大鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforgp210ELISAKit大鼠抗核膜糖蛋白210抗體

細(xì)胞凍存試劑盒50次

Ratthyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

TH重組小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 蛋白 Protein

白介素1β(IL1β)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Beta (IL1b)

GSTK1重組人 GSTK1 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

白介素1β(IL1β)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Beta (IL1b)

FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

TH重組小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 蛋白 Protein

IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GSTK1重組人 GSTK1 蛋白 Protein

WEHI 164 (鼠纖維肉瘤細(xì)胞)小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human acid phosphatase (ACP) ELISA Kit 人酸性0酸酶(ACP)檢測(cè)試劑盒

Humanplateletfactor3,PF3ELISAKit 人原片段F1+2(F1+2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanarabinogalactanproteins,AGPs檢測(cè)試劑盒人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物游離氨基酸含量熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

humahyroidstimulatingimmunoglobulin,TSIELISAKit人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

細(xì)胞間黏附分子3檢測(cè)試劑盒   細(xì)胞間黏附分子3試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   細(xì)胞間黏附分子3試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：細(xì)胞間黏附分子3試劑盒、細(xì)胞間黏附分子3eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔子纖溶酶原檢測(cè)試劑盒   兔子纖溶酶原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子纖溶酶原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子纖溶酶原試劑盒、兔子纖溶酶原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豚鼠肝細(xì)胞生長因子檢測(cè)試劑盒   豚鼠肝細(xì)胞生長因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠肝細(xì)胞生長因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠肝細(xì)胞生長因子試劑盒、豚鼠肝細(xì)胞生長因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔子脫氫表雄酯檢測(cè)試劑盒   兔子脫氫表雄酯試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子脫氫表雄酯試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子脫氫表雄酯試劑盒、兔子脫氫表雄酯eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。