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UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細(xì)胞)
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細(xì)胞)正在出售的產(chǎn)品：LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 Human RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) 大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96 Calu-6細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞系(未分化) 大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-2G細(xì)胞 CM-M097小鼠皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 雞 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱 UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1
種屬 家雞
年齡（性別） 10日齡
組織來(lái)源 胚胎，自發(fā)永生化
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))
UMNSAH/DF-1細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株，自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維細(xì)胞并在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，傳代直到衰老；在衰老過(guò)程中離心以保持細(xì)胞培養(yǎng)在30%到60%滿；不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒(méi)有觀察到克隆增殖，說(shuō)明UMNSAH/DF-1細(xì)胞是永生化而沒(méi)有轉(zhuǎn)化。UMNSAH/DF-1細(xì)胞可作為病毒增殖、重組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。 |
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~22-36小時(shí)
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：39℃（Max.40℃，Min.38℃）
致瘤性 No, in immunosuppressed mice. No, in semisolid medium.
注意事項(xiàng) 1、該細(xì)胞培養(yǎng)難度較高，溫度波動(dòng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞空泡增多； 2、該細(xì)胞為38℃~40℃培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為39℃，37℃培養(yǎng)會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)，建議提前準(zhǔn)備專用培養(yǎng)箱； 3、受溫度波動(dòng)影響，收貨常見(jiàn)細(xì)胞空泡較多，穩(wěn)定培養(yǎng)后可恢復(fù)。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠三0酸肌醇(IP3)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IP3 ELISA Kit
Mouse androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 小鼠雄(ASD)檢測(cè)試劑盒
RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHA(Humanhemagglinin)ELISAKit人血凝素
細(xì)胞半胱蛋白酶-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
SFRP4重組小鼠 sFRP4 蛋白 Protein
CIDEB peptide CIDEB抗原 0.5mgCIDEB peptide CIDEB抗原
AKR1B1重組人 AKR1B1 蛋白 Protein
HOXA1 Protein Human 重組人 HOXA1 蛋白
SERPINF2 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF2 蛋白
CIDEB peptide CIDEB抗原 0.5mgCIDEB peptide CIDEB抗原
HOXA1 Protein Human 重組人 HOXA1 蛋白
SFRP4重組小鼠 sFRP4 蛋白 Protein
SERPINF2 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF2 蛋白
AKR1B1重組人 AKR1B1 蛋白 Protein
UMNSAH/DF-1 (雞胚成纖維細(xì)胞)小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat vitamin A (VA) ELISA Kit 大鼠A(VA)檢測(cè)試劑盒
HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 人生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCollectin檢測(cè)試劑盒人膠原凝集素(Collectin)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織Akt1/PKBa激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinE,FcεRⅡELISAKitEFc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔交聯(lián)物(PY)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔白細(xì)胞介素-35（IL-35）檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔白細(xì)胞介素-35（IL-35）檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
