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小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Alveolar PrimaCell: Normal Alveolar Macrophages】
  小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞容易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以生存。 利用本公司試劑盒中提供的組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的組織能使得細(xì)胞一些功能特性發(fā)生改變,從而將平滑肌細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的肺泡巨噬細(xì)胞。本試劑盒包含: ()OptiTDSTM小鼠肺泡巨噬細(xì)胞組織解離液(3×ml) (2)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞組織處理緩沖液(00ml) (3)FibrOutTM小鼠肺泡巨噬細(xì)胞成纖維抑制劑(ml(500X)) (4)小鼠肺泡巨噬組織洗液(5 x 00 ml) (5)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞生長因子(ml500X)及血清(5x0ml) (6)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) (7)小鼠肺泡巨噬組織預(yù)備液( x 00 ml) (8)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書

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小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

Mouse Alveolar PrimaCell: Normal Alveolar Macrophages

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注意事項:
. 接收到小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟:
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

根瘤菌 Rhizobium sp.

C4-2(人前列腺細(xì)胞)5×06cells/瓶×2

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

SW626(人卵巢細(xì)胞)5×06cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

松杉暗孔菌 Phaeolus schweinitzii

人心房肌細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

QBC-939, 人膽管細(xì)胞 Human

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書鄰二硝分子式:68.英文名稱:Two nitrobenzene:528-29-0分子量: C6H4N2O4

乙二乙英文名稱:Ethylene glycol ether分子式:90.2分子量: C4H0O2:0-80-5

鄰硝對甲砜氯分子式:235.64英文名稱:Ortho para nitro group:3565分子量: C7H6ClNO4S

--3-甲-5-吡唑分子式:73英文名稱:- phenyl -3- methyl -5-:3-8-6分子量: C0HN3

2-啉分子式:63.6英文名稱:2- chloride:62-62-4分子量: C9H6ClN

5-溴-8-硝異喹啉分子式:253.06英文名稱:5- -8- nitro group:63927-23-分子量: C9H5BrN2O2

2,3,5,6-四氟吡分子式:5.06英文名稱:2,3,5,6- Pyridines:2875-8-5分子量: C5HF4N

英文名稱:Up to that分子式:337.46分子量: C22H27NO2:7230-88-5

柴胡皂苷D英文名稱:Radix D分子式:780.98分子量:C42H68O3:20874-52-6

性媒介綠GS英文名稱:Acid medium green GS分子式:46.38分子量: C20H3N2NaO5S:6408-78-2 

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