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小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱:Mouse β-Defensins ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

5-異喹啉    分子式:    44.7    分子量:    C9H8N2    英文名稱:    5-aminogroup    :    25-60-6
5-吲唑    分子式:    33.5    分子量:    C7H7N3    英文名稱:    Aminoindazole5-    :    9335--6
6-(氯甲)脲嘧    分子式:    60.56    分子量:    C5H5ClN2O2    英文名稱:    6-(CL)urea    :    8592-3-7
6,6'-二-2-甲吡    分子式:    84.24    分子量:    C2H2N2    英文名稱:    6,6'-two-2-methylpyridine    :    44-80-7
6,6'-二溴-2,2'-聯(lián)吡    分子式:    33.98    分子量:    C0H6Br2N2    英文名稱:    6,6'-dibromo-2,2'-bipyridine    :    49669-22-9
6,7-二甲氧香    英文名稱:    6,7-twoa    :    20-08-    分子式:    206.947    分子量:    CH0O4
6,7-二羥香豆    英文名稱:    6,7-twohydroxygroup    :    305-0-    分子式:    78.4    分子量:    C9H6O4
6,8-二甲氧-4-甲喹啉水合物    分子式:    203.24    分子量:    C2H3NO2·xH2O    英文名稱:    6,8-two,a-4-methylgroup,agroupofoxygenbased    :    5049-4-0
6-[(3-氯丙)]-,3-二甲尿嘧    分子式:    23.68    分子量:    C9H4ClN3O2    英文名稱:    6-[(3-LvBingji)]-,3-twoaminomethyluracil    :    34654-8-4
6-[2-(,-二甲乙)-5-(6-甲-2-吡)-H-咪唑-4-]喹喔啉    分子式:        分子量:    C2H2N5    英文名稱:    6-[2-(,-two-5-(methylethyl)6-methylimidazole-2-pyridine)-H--4-]quinoxaline    :    356559-20-
6---甲-5(丙)尿嘧    分子式:    98.23    分子量:    C8H4N4O2    英文名稱:    6----5(BingAnji)aminomethyluracil    :    25092-42-4
6---甲脲嘧    分子式:    4.3    分子量:    C5H7N3O2    英文名稱:    6-ami-    :    2434-53-9
620擔(dān)體    英文名稱:    620body    :        分子式:        分子量:    
6--2-氟甲    分子式:        分子量:        英文名稱:    6-amino-2-fluoride    :    433-86-7
6--2-甲喹啉    分子式:    58.2    分子量:    C0H0N2    英文名稱:    6-amino-2-methylgroup    :    65079-9-8一管式病毒 RNAout    200 次    
重組蛋白(非病毒)系列    --    
酸水解酪素    00g    
磷酸氫二    250g    
23-0020-    5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )    mL
00939-00    福林酚試劑    00mL
20668J-    4mL DNA 離心超濾管 (300-500 KD)    個
小鼠β-防御素 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格柱式土壤 DNAout    50 次    
質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品    2μg    
即用型 GFP 標(biāo)簽蛋白裂解液    00μL    
JM07 菌種    mL    
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-0000 bp)    50 次    
人胰島細胞分離液 .056    200mL    
芥子酸    g    
DMEM( 高糖 )    0L    

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