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小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: NT-3 ELISA kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

SEMA4A    重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白 (His 標簽)    SEMA4A
MGAT5    重組人 MGAT5 / GGNT5 蛋白 (His 標簽)    MGAT5
CA4    重組人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 (His 標簽)    CA4
DPP0    重組人 DPP0 / DPRP3 蛋白 (His 標簽)    DPP0
SIRPG    重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD72g 蛋白 (His 標簽)    SIRPG
NT5E    重組人 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽)    NT5E
CEACAM3    重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白 (His 標簽)    CEACAM3
HMGB    重組人 HMGB / HMG 蛋白 (His 標簽)    HMGB
SEMA4D    重組人 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD00 蛋白 (His 標簽)    SEMA4D
CD60    重組人 CD60 蛋白 (His 標簽)    CD60
KLK4    重組人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 (His 標簽)    KLK4
ALDHA3    重組人 ALDHA3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)    ALDHA3鏈霉親和素磁珠    2mL    
000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )    00 支    
Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)    20μL    
GTP 溶液,00mM    0.25mL    
8-070-00    總 SOD 活性檢測試劑盒 (WST 法 )    00 次
3208-0    DNA 探針變性液    0mL
TEV 蛋白酶    300U    
非凍型血液 RNA 保存液    0mL    
多聚 -L- 賴氨酸 (7-5 萬 )    25mg    
小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格哺乳動物種屬鑒定 PCR Mix    00 次    
CAS9002-89-5        00g
8083-50    Western 印跡膜抗體清除劑    50mL
3290-400    RNase 抑制劑 ( 人源 )    400U
牛血紅蛋白    5g    
AH09 酵母菌種    mL    
Quin-2AM    mg    
沉淀型 TMB 顯色試劑盒    00mL    

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