細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

LN-229人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

種屬來源：人

性別年齡：60 歲，女性

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格：1 X 106cells/T25 或 1 mL 凍存管

培養(yǎng)條件：DMEM+5% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(sm Actinin-α)檢測試劑盒 ，英文名： sm Actinin-α ELISA Kit

Rabbit urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 兔型纖溶酶原激活物(uPA)檢測試劑盒

漢坦病毒Ⅰ型(HTV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseClusterofdiffereiation19,CD19ELISAKit小鼠CD19分子

體液氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKit17-OHCS人17羥皮質(zhì)類固醇

PGLYRP1重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

5-LOX (5-lipoxygenase 0.5mg5-LOX (5-lipoxygenase) 5-脂氧合酶抗原

BLOC1S2重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IL1R2 Protein Rat 重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標(biāo)簽)

低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)

ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

ATP5D重組人 ATP5D 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LN-229人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA 試劑盒

Human colon cancer aigen (CCA) ELISA Kit 人結(jié)腸癌抗原(CCA)檢測試劑盒

PorcinesolubleP-selectin,sP-SelectinELISAKit 豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlpha-GSTELISAKit大鼠αS轉(zhuǎn)移酶

血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性熒光定量檢測試劑盒20次

PlaGibberellicAcid,GAELISAKit植物赤(GA)檢測試劑盒

豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit   ELISA. 

豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISAKit   ELISA. 

豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISAKit   ELISA. 

豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKit   ELISA.